核糖核酸(RNA)提取是分子生物学研究中常用的一种实验室过程。通过分离RNA链,研究人员可以研究从细菌到人类等多种生物的遗传成分。虽然脱氧核糖核酸(DNA)是与遗传研究相关联的最常见的核酸,但RNA是DNA和细胞蛋白质之间的联系,负责各种结构作用。提取RNA使科学家能够研究从DNA信息到蛋白质生产和细胞功能的途径。
一种常见的RNA提取方法是酚氯仿提取,也称为PC或PCIA。核酸,以DNA和RNA的形式,保存细胞功能和复制所需的遗传信息,是DNA和细胞蛋白质之间的联系。特定类型的RNA复制DNA的特定部分来帮助这些蛋白质的形成。遵循DNA和细胞蛋白质之间的路径,有助于研究人员了解单个细胞内的基因调节和蛋白质合成。有助于RNA提取和确保样本质量的过程稳定性为研究人员提供了一种跟踪DNA和RNA之间路径的方法。
提取RNA需要使用酶处理,这些酶可以去除脱氧核糖核酸(DNA)和样本中可能存在的蛋白质,生物样品被还原和纯化到可以分离出RNA以备日后检查的程度。分子成分,如蛋白质、RNA和DNA,在不同的时间进行分割或分离,以便提取特定类型的RNA。不同的组织和细胞类型需要不同的RNA提取方法虽然有多种方法可以进行RNA提取,但最常见的方法是用离心法将生物样本与各种化合物(统称为变性剂)混合。一种常见的RNA提取方法是酚氯仿萃取,也称为PC或PCIA。使用这种方法,组织样本被等份混合苯酚和氯仿。这种混合物被称为双相混合物,在变性溶液中离心。会产生两个相,第一个是水相,第二个是有机相。RNA提取是在水相中进行的,在乙醇沉淀的帮助下。提取RNA的其他方法也各不相同,这取决于样本大小、组织类型以及是否需要全部或部分RNA。对于酵母、植物或动物样本,完整RNA或总真核RNA,都需要样本。而细菌,需要总的原核RNA。每种类型的RNA都需要不同的样品制备、提取和储存方法。RNA提取的并发症是常见的,通常与提取后RNA的降解有关。组织样本中常见的核糖核酸酶能快速降解RNA。如果不快速使用,RNA作为回应,许多RNA提取方法包括在提取前和提取后制备样品储存的步骤,以减少或减缓RNA的分解。


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