磷酸化水平如何确定(Phosphorylation Level Determined)？

有机分子或物质的磷酸化水平由两种方法确定：蛋白质印迹法和质谱法。磷酸化通常指的是磷酸盐与蛋白质的结合。当磷酸盐与蛋白质结合时，人体内蛋白质酶的自然过程和功能受到干扰。测定磷酸化水平对于治疗从癌症到糖尿病等多种疾病至关重要。在植物细胞中，ATP分子是利用太阳的能量产生的。Western blotting是一种常用的方法来测定一组特定蛋白质的磷酸化水平。通常使用抗磷酸酪氨酸单克隆抗体等抗体，因为它们很容易与蛋白质酪氨酸残基结合，在western印迹法中，蛋白质首先通过一种称为凝胶电泳的电荷方法按大小进行分离。然后蛋白质被转移到一个被特殊抗体覆盖的膜上，这种抗体与蛋白质上的磷酸盐结合。一旦蛋白质被转移，抗体会粘附在任何带有磷酸盐的蛋白质上，然后通过对细胞膜的x光来确定磷酸化水平。任何受影响的蛋白质都会发出闪光，使研究人员更容易测量磷酸化水平。质谱是另一种测量磷酸化水平的方法指一种物质。这个过程将蛋白质分子转化成离子，这使得它们更容易被跟踪和测量。样品被一个充满电子的高功率离子源电离。这个作用使样品变成阳离子，带正电荷的离子。质谱仪的质谱分析仪分离离子根据它们的质量和电荷强度这使研究人员能够发现质量电荷比，这对发现样品的磷酸化水平至关重要。最后，探测器按顺序测量离子，以便数据可以以图表形式显示。图表显示x轴上离子的质量电荷比，以及y轴上离子的相对强度。也可以在底物磷酸化过程中测量磷酸化水平。底物磷酸化是产生三磷酸腺苷（ATP）的过程，ATP是细胞间能量转移的关键分子，在糖酵解过程中。这个过程发生在动物细胞和植物细胞中。在植物细胞中，ATP分子是通过利用太阳的能量产生的。这种能量刺激植物叶绿体的磷酸化，叶绿体是植物光合作用的场所。磷酸化水平与产生额外的磷酸盐所需的磷酸盐量有关ATP分子。