肽是由氨基酸组成的小聚合物,许多具有生物活性,如激素、毒素或其他功能。这类化合物常用于生物、医疗、医疗等领域,以及化学研究。当大量的蛋白质连接在一起时,它们也是蛋白质的组成部分。肽纯化是一种用来纯化大量所需肽的技术,或者帮助分离蛋白质消化过程中产生的肽。
不同的肽在不同的时间点洗脱,并通过监视器(通常是紫外分光光度计)进行检测。肽的纯化是通过使用色谱技术,一种分离不同结合的化合物的方法来完成的高压液相色谱法(HPLC)通常用于肽的纯化。当在高压下通过一个小珠柱时,一个或多个肽被应用于溶剂混合物中,随着时间的推移,这些溶剂会随着时间的推移而变化。不同的肽在不同的时间点洗脱,并通过监视器进行检测,通常使用紫外分光光度计。
肽纯化是一种用于纯化大量所需肽或帮助分离蛋白质消化产生的肽的技术,通常感兴趣的物质是稀有的,不能从化学公司购买。如果已知所需肽的结构,通常通过肽合成化学制备比从天然来源分离化合物容易得多。天然产物分离是出了名的困难。合成肽通常用高效液相色谱法纯化。这种化学合成对于一个不是化学家的独立研究人员来说可能是令人望而生畏的经常,这项任务由专门从事这些技术的肽合成公司承包。这可能比在实验室里从头开始建立系统更经济。肽公司可以根据研究人员的需要定制肽。肽纯化的另一个原因是研究人员用质谱仪分离蛋白质片段,然后用质谱仪测定蛋白质碎片,液相色谱-质谱法是液相色谱-质谱法的缩写。它给出了片段的分子量和氨基酸组成,如果之前已经鉴定出相似或相同的蛋白质,通常可以识别蛋白质。许多研究人员研究具有新特征的肽,如非天然氨基酸,试图找到具有特殊生物活性的化合物。有一个叫做拟肽组学的领域专门研究这种新的肽。通常,计算机生成的序列被设计出来,我们合成了一个包含一系列非典型肽的肽库。肽纯化被用来分离这个库中的单个成员,以提供纯肽来测试生物活性。这个策略已经成功地产生了至少一种新的商用药物,其中许多具有生物活性肽在医学上有着重要的用途。商业上使用的化合物,如胰岛素,通常是由重组DNA过度表达系统产生的,这些系统可以产生大量所需的化合物。通常,这些肽是经过基因工程改造的,通过在其前端添加某种标签来促进纯化,这就允许使用亲和层析来纯化肽在这种色谱法中,标记物是一种化合物,比如组氨酸,它能结合一种珠子基质,比如镍,因为它能与标签结合而被选中。不需要的蛋白质和肽通常不需要结合就可以通过色谱柱。特别设计的肽通常与色谱柱紧密结合。在污染的蛋白质和肽被洗掉后,所需肽被一种竞争性结合到基质上的化合物洗脱,然后制备出相当纯的所需肽,并且可以通过切割去除标签。
肽纯化用于重组DNA过度表达生产胰岛素。



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