异硫氰酸荧光素偶联抗体(FITC)是一种对某一特定蛋白质或原抗体高度特异的荧光分子标记物,可用于免疫细胞化学、酶和蛋白质活性测定、流式细胞术等领域鉴定蛋白质,大多数FITC抗体可以通过专门的分子生物学公司购买或由个别研究实验室制造。
FITC抗体可以通过分子生物学公司或研究实验室获得。FITC是一种荧光色素,通常与抗体结合或连接,以使特定的荧光标记。当暴露在特定波长的电磁能量下时,荧光色素是一种化学物质,它将吸收能量并在特定波长发射光子。FITC在495 nm处吸收能量,在521 nm处发射光子。每种荧光色素都有不同的吸收和发射范围,允许系统在一片组织或样本中检测出许多与萤光色素相关的抗体。这类似于用不同颜色标记细胞的不同部分,然后使用专用眼镜一次只观察一种颜色。
实验室可以制备自己的初级抗体,并使用试剂盒将FITC与之结合抗体可以与FITC分子连接或结合,产生FITC抗体。这种FITC抗体可用于直接或间接标记蛋白质。当FITC抗体直接标记蛋白质时,它充当主要抗体,或与抗原直接接触的抗体。间接使用FITC抗体的情况是用作二级抗体,与一级抗体特异结合直接使用FITC结合抗体时,标记过程耗时较少,但标记强度不高;间接标记需要额外的步骤,但信号或标记会被放大,因为几个FITC标记的次级抗体可以附着到一个初级抗体上。FITC抗体在细胞和分子生物学。这种类型的抗体可以单独使用,也可以与其他单克隆或多克隆抗体结合使用,用免疫细胞化学技术来标记细胞内的特定蛋白质。FITC抗体也可以用于酶和蛋白质活性测定、流式细胞术和Western blotting等技术中。FITC许多分子生物学公司都能广泛获得偶联的一级抗体和二级抗体。实验室也可以自己制备一级抗体,然后用试剂盒将其与FITC偶联。有些公司会将实验室制备的一级抗体与FITC荧光色素偶联,用于实验室FITC结合的二级抗体通常不是由单个研究实验室制造的,通常是从专门生产二级抗体的公司购买的。


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